NEBuilder HiFi DNA Assembly permet d’assembler sans erreur des fragments d’ADN, même ceux comportant des mésappariements en 5′ et 3′.
Ce kit flexible est conçu pour un clonage à jonctions invisibles simple et rapide, à l’aide d’une nouvelle polymérase haute fidélité exclusive.
NEBuilder HiFi est la solution d’assemblage d’ADN et de clonage de nouvelle génération.
Principe de NEBuilder HiFi DNA Assembly
Illustration de la méthode NEBuilder
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Illustration du flux de travail NEBuilder
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Avantages par rapport à Gibson Assembly® Master Mix :
- Assemblage haute fidélité quasi exempt d’erreur, avec moins d’étapes de criblage et de reséquençage des constructions
- Assemblage plus efficace des fragments d’ADN, même ceux de grande taille ou disponibles en faible quantité
- Possibilité d’utiliser NEBuilder HiFi dans des cycles d’assemblage successifs, grâce à l’élimination des mésappariements en 5′ et 3′
- Possibilité de relier deux fragments double brin à un oligo ADN simple brin synthétique pour une construction simple et rapide (exemple : insertion d’un espaceur ou banques d’ARNg)
- Compatibilité avec les fragments conçus pour Gibson Assembly (et autres), pour un transfert facile depuis d’autres systèmes
- Gain de temps considérable grâce à un clonage à jonctions invisibles simple et rapide
- Produits NEBuilder utilisables sans acquittement d’une licence auprès de NEB
NEBuilder Assembly Tool
NEBuilder Assembly Tool a été conçu pour vous aider à concevoir des amorces pour votre assemblage d’ADN.
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NEBioCalculator
Vous pouvez utiliser cet outil pour effectuer vos calculs et conversions en biologie moléculaire.
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Comparaison entre NEBuilder et Gibson Assembly
NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix offre une efficacité et une reproductibilité supérieures à celles de Gibson Assembly pour différents nombres de fragments.
Des réactions d’assemblage de 2 et 6 fragments ont été préparées dans les conditions recommandées.
NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix offre une efficacité et une précision supérieures à celles de Gibson Assembly pour les faibles quantités d’ADN en augmentant la longueur de chevauchement.
Des réactions d’assemblage de 4 fragments ont été préparées dans les conditions recommandées. La quantité d’ADN et la longueur de chevauchement sont indiquées dans le graphique.
NEBuilder HiFi DNA Master Mix offre une meilleure fidélité que Gibson Assembly Master Mix
La fidélité des produits assemblés à l’aide de NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix (NEB réf. E2621) a été comparée avec celle des produits d’assemblage obtenus avec Gibson Assembly Master Mix (NEB réf. E2611). Les expériences ont été réalisées avec des fragments et des vecteurs de différentes tailles selon les protocoles suggérés. Dans les expériences D et E, aucune colonie n’a été obtenue avec Gibson Assembly. Les expériences H et J ont été réalisées avec des fragments contenant des mésappariements en 3′. Les expériences B à G diffèrent par les séquences des fragments.
Vidéos
NEBuilder HiFi DNA Assembly
Primer Design and Fragment Assembly Using NEBuilder HiFi DNA Assembly or Gibson Assembly
NEBuilder HiFi DNA Assembly: Bridging dsDNA with a ssDNA Oligo
3 nouvelles notes d’application
Liste des produits disponibles
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| PRODUIT | REF. | COND. | PRIX | PLUS D’INFOS |
|---|---|---|---|---|
| NEBuilder HiFi DNA Assembly Cloning Kit | E5520S | 10 rxns |  |
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| NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix | E2621S/L/X | 10/50/250 rxns | |
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| NEBuilder HiFi DNA Assembly Bundle for Large Fragments | E2623S | 20 rxns | |
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Plus d’informations disponibles dans la section Ressources Techniques ou sur neb.com
