Polymérases pour Amplification Isothermale

Bst 2.0 DNA Polymerase

Bst 2.0 DNA Polymerase est un homologue conçu in silico du grand fragment de l’ADN polymérase I de Bacillus stearothermophilus (Bst DNA Polymerase, Large Fragment). Bst 2.0 DNA Polymerase possède une activité ADN polymérase 5′→3′ ainsi qu’une forte capacité de déplacement de brin, mais est dépourvue de fonction exonucléase 5′→3′. Bst 2.0 DNA Polymerase présente une vitesse d’amplification, un rendement, une tolérance au sel et une thermostabilité améliorés par rapport à son homologue sauvage.

Bst 2.0 WarmStart™ DNA Polymerase

Bst 2.0 WarmStart DNA Polymerase est un homologue conçu in silico du grand fragment de l’ADN polymérase I de Bacillus stearothermophilus (Bst DNA Polymerase, Large Fragment), lié de manière réversible à un aptamère qui inhibe son activité polymérase à des températures inférieures à 45 °C. L’aptamère libère rapidement Bst 2.0 WarmStart DNA Polymerase lorsque la température dépasse 45 °C – une étape d’activation séparée n’est donc pas nécessaire.

„Improved Reagents for Isothermal DNA Amplification“

Dr. Nathan Tanner, New England Biolabs Inc.

Une RT-LAMP rapide et grâce à une seule enzyme est possible avec Bst 3.0 La RT-LAMP a été réalisée avec les différentes ADN polymérases indiquées, l’ARN total de Jurkat et les amorces pour deux gènes (ACTB, à gauche; HMBS2, à droite). Les résultats les plus rapides ont été obtenus avec un système de 2 enzymes, Bst 2.0 et WarmStart RTx, mais l’amplification la plus robuste a été obtenue avec la Bst 3.0 sans RT additionnelle. La Bst LF, Bst 2.0 et les enzymes des compétiteurs montrent de performances très variables, avec des seuils atteints plus tardivement ou des échecs de la réaction avec une des 2 cibles.

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