Luna® – Optimize RT-qPCR with unique WarmStart® technology

Les kits Luna RT-qPCR contiennent une nouvelle transcriptase inverse (RT) conçue in silico pour des performances améliorées. Un aptamère thermosensible est utilisé dans ces kits pour inhiber l’activité de Luna WarmStart Reverse Transcriptase et de Hot Start Taq DNA Polymerase à des températures inférieures à 45 °C. Cela permet de préparer les réactions à température ambiante et d’empêcher toute activité non spécifique indésirable. En outre, Luna WarmStart RT offre une thermostabilité accrue, pour de meilleures performances aux températures élevées.

Des performances améliorées avec notre nouvelle transcriptase inverse thermostable

• Une transcriptase inverse robuste, pour une spécificité, une sensibilité et une efficacité améliorées
• Une thermostabilité accrue, pour une plus grande flexibilité dans la préparation des réactions et une meilleure spécificité

Luna WarmStart Reverse Transcriptase affiche une sensibilité, une reproductibilité et des performances RT-qPCR exceptionnelles

Des réactions de RT-qPCR ciblant l’ARNm de la GAPDH humaine ont été réalisées avec Luna Universal One-Step RT-qPCR Kit (contenant Luna WarmStart Reverse Transcriptase), à partir d’ARN totaux de cellules Jurkat à des concentrations couvrant 8 ordres de grandeur (0,1 pg – 1 μg), en 8 réplicats par concentration. NTC = contrôle sans matrice (Non-Template Control).

Des réactions mieux contrôlées pour des résultats optimaux en couplant Luna WarmStart RT à Hot Start Taq DNA Polymerase

• Les technologies WarmStart et Hot Start vous permettent de mieux contrôler la réaction et d’éviter toute amplification non spécifique.
• La technologie exclusive WarmStart est disponible uniquement dans les produits de NEB.

Luna WarmStart RT empêche toute amplification non spécifique due à une préincubation à température ambiante

Des réactions de RT-qPCR ciblant l’ARNm de la protéine ribosomale L32 humaine ont été réalisées en triplicat, avant et après une incubation de 24 heures à température ambiante, avec des ARN totaux de cellules Jurkat à des concentrations couvrant 5 ordres de grandeur et un contrôle sans matrice. Luna Universal One-Step RT-qPCR Kit, qui contient Luna WarmStart Reverse Transcriptase, a affiché des performances robustes sans amplicon détectable pour le contrôle sans matrice, que ce soit avec ou sans préincubation à 25 °C pendant 24 heures. En revanche, le 1-Step Kit d’ABI, qui contient une transcriptase inverse sans technologie WarmStart, a présenté une amplification importante pour le contrôle sans matrice.

Une meilleure thermostabilité pour une polyvalence accrue

• Une température de transcription inverse supérieure est idéale pour les matrices difficiles

La haute thermostabilité de Luna WarmStart Reverse Transcriptase améliore ses performances aux températures élevées

Des réactions de RT-qPCR ciblant l’ARNm de la protéine ribosomale L32 humaine ont été réalisées en triplicat à partir d’ARN totaux de cellules Jurkat à des concentrations couvrant 5 ordres de grandeur (5 pg – 50 ng), avec une étape de transcription inverse initiale de 10 min à 50 °C, 55 °C ou 60 °C comme indiqué.

A. Luna WarmStart Reverse Transcriptase (température d’incubation recommandée : 55 °C) a donné de faibles valeurs de C_q (voir histogramme) et des performances RT-qPCR robustes (voir courbes d’amplification) à toutes les températures, ce qui montre une transcription inverse efficace et non perturbée par les changements de température.

B. En revanche, une transcriptase inverse MMLV disponible sur le marché (température d’incubation recommandée : 50 °C) a affiché des valeurs de C_q accrues, des performances moindres et une absence de détection de la quantité de matrice la plus faible aux températures élevées, ce qui indique une perte d’activité RT.

Un ou plusieurs de ces produits sont protégés par des brevets, marques déposées et/ou droits d’auteur détenus ou contrôlés par New England Biolabs, Inc. Pour plus d’informations, veuillez nous envoyer un e-mail à l’adresse gbd@neb.com. L’utilisation de ces produits peut nécessiter l’obtention de droits de propriété intellectuelle supplémentaires auprès de tiers pour certaines applications.

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