La ligature de l’ADN est une étape cruciale dans de nombreux processus de biologie moléculaire. La liaison entre les résidus adjacents d’une coupure simple brin sur un substrat double brin et la jonction des cassures double brin sont catalysées par des enzymes, les ADN ligases.
Pour une liste complète des ADN ligases et des master mix proposés par NEB, ainsi que des suggestions d’applications, veuillez consulter notre DNA Ligase Selection Chart (tableau de sélection des ADN ligases).
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Pureté exceptionnelle de la T4 DNA Ligase de NEB
Les protéines ont été chargées en quantités équivalentes et colorées à l’argent à l’aide de SilverXpress™. La piste M correspond au Broad Range Protein Marker (NEB réf. P7702).
Contrôle qualité de la T4 DNA Ligase | ||
Pureté physique | Détermination par SDS-PAGE (gel coloré à l’argent) (figure 1) | |
Activité exonucléase | Dosage des exonucléases contaminantes en mesurant la libération d’un substrat d’ADN radioactif. Dosage de types spécifiques d’exonucléases contaminantes présentes à de très faibles concentrations par électrophorèse capillaire avec un substrat coloré (figure 2) | |
Activité nucléase | Dosage des nucléases contaminantes par incubation avec les produits de digestion de l’ADN du phage lambda par HindIII | |
Activité endonucléase | Incubation avec de l’ADN plasmidique superenroulé pendant 4 heures pour détecter toute coupure ou dégradation non spécifique par des nucléases. | |
Dosage fonctionnel | Ligature à température ambiante |
Liste des produits disponibles
Plus d’informations disponibles dans la section Ressources Techniques ou sur neb.com